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DON 呕吐毒素单抗对小鼠呕吐毒素中毒解毒试验

发布时间:2016-07-13 点击数:2173

1 材料与方法

1.1 试验动物

健康昆明系小白鼠6只,体重18g±2g

1.2 主要试剂

黄曲霉毒素标准品(DON 呕吐毒素)、抗DON 呕吐毒素-B6单抗(稀释倍数为1:64W时,OD值为1.02)

1.3 试验动物分组

将健康小鼠饲养观察两周后,随机分成ABC3组,A组为空白对照组(2)B组为试验对照组(2),即仅注射黄曲霉毒素标准品;C组为试验组(2),注射黄曲霉毒素标准品+注射黄曲霉毒素单抗。

1.4 小鼠DON 呕吐毒素中毒试验和解毒实验

1.4.1  A组:小鼠不做任何处理,只按常规方法喂养,每天观察一次常规指标(进食、体重、精神、运动情况)

1.4.2  BC组:试验1100μl DON 呕吐毒素 1mg/ml+400μl生理盐水,取100μl静脉注射到18g左右昆明鼠尾部。即注射剂量为20μg DON 呕吐毒素/18g

          试验7150μl DON 呕吐毒素 1mg/ml+350μl生理盐水,取100μl静脉追加注射到18g左右昆明鼠尾部。即注射剂量为30μg DON 呕吐毒素/18g

1.4.3  C组:C组小鼠出现中毒症状后,当日尾静脉注射黄曲霉毒素(DON 呕吐毒素)单抗(30μl DON 呕吐毒素-B6+270μl生理盐水,取100μl静脉注射),以后每天观察一次常规指标(进食、体重、精神、运动情况),直至小鼠恢复正常的生理状况。

1.5 检测方法

1.5.1 临床症状观察 每天观察各组小鼠的采食、饮水、精神、粪便、被毛、运动等临床表现。

1.5.2 体重称量  每天各组小鼠给水量相同,共饲喂14天,每天称重1次。

2 小鼠DON 呕吐毒素中毒和解毒的结果

  小鼠DON 呕吐毒素中毒和解毒的结果见表1 

1 小鼠中毒解毒试验结果

项目

A(对照组)

B(DON 呕吐毒素试验对照组)

C(DON 呕吐毒素试验组)

备注

1 

注射毒素

 16.0g/;

 16.8g/只。

进食正常,精神正常。

 18.0g/;

 16.0g/只。

进食正常,精神正常,

行动迅速。

尾静脉注射20μg DON 呕吐毒素/只。

 16.7g/;

 16.5g/只。

进食正常,精神正常,

动迅速。

尾静脉注射20μg DON 呕吐毒素/只。

2

 16.4g/;

 17.2g/只。

进食正常,精神正常。

 18.3g/;

 16.2g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

 16.3g/;

 16.5g/只。

进食减少,精神正常,

动迅速。

3

 17.5g/;

 18.0g/只。

进食正常,精神正常。

 19.0g/;

 16.5g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

 16.5g/;

 16.7g/只。

进食减少,精神正常,

动迅速。

4

 18.4g/;

 18.6g/只。

进食正常,精神正常。

 19.7g/;

 17.0g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

 17.0g/;

 17.3g/只。

进食减少,精神正常,

动迅速。

5

 19.1g/;

 19.2g/只。

进食正常,精神正常。

 20.2g/;

 18.5g/只。

进减少,精神正常,

行动迅速。

 17.5g/;

 18.6g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

6

 20.0g/;

 20.2g/只。

进食正常,精神正常。

 20.2g/;

 19.5g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

 17.6g/;

 19.4g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

7

追加毒素

 20.2g/;

 20.4g/只。

进食正常,精神正常。

 21.0g/,

 20.2g/,

进食减少,精神正常,

行动迅速。

追加30μg DON 呕吐毒素/只昆明鼠。

 18.0g/;

 20.3g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

追加30μg DON 呕吐毒素/只昆明鼠。

8

 20.3g/;

 20.8g/只。

进食正常,精神正常。

 19.8g/只。

进食大大减少,精神低迷,

行动迟缓。

 24h死亡。

 16.9g/;

 20.1g/只。

进食减少,精神低迷,

行动迟缓。

9

注射DON 呕吐毒素单抗

 20.4g/;

 21.8g/只。

进食正常,精神正常。

 48h死亡。

 16.3g/;

 19.6g/只。

进食减少,精神低迷,

行动缓慢。

尾静脉注射DON 呕吐毒素单抗。

10

 20.9g/;

 22.4g/只。

进食正常,精神正常。

 16.3g/;

 19.6g/只。

进食减少,精神正常,

行动迅速。

11

 21.0g/;

 22.8g/只。

进食正常,精神正常。

 16.8g/;

 20.1g/只。

进食正常,精神正常,

行动迅速。

14

 21.0g/;

 22.8g/只。

进食正常,精神正常。

 19.0g/;

 22.2g/只。

进食正常,精神正常,

行动迅速。

3

3.1 小鼠DON 呕吐毒素中毒的结果

试验对照组、试验组小鼠注射DON 呕吐毒素结果见表1。空白对照组小鼠在试验期间各指标一直正常,试验对照组与试验组小鼠第一次给毒20μg DON 呕吐毒素/16g小鼠,第2-7天中出现轻度中毒症状,即食欲不振,体重增速减缓。追加剂量30μg DON 呕吐毒素/18g小鼠后第2天即出现重度中毒症状,即食欲减退、精神低迷、行动减缓,体重降低,严重者1-2天内死亡。表明小鼠中毒剂量在20~50μg之间。

3.2小鼠DON 呕吐毒素解毒的结果

试验组小鼠出现中毒症状后2天,进行解毒即注射10μlDON 呕吐毒素-B6单抗/只小鼠,第2天即出现解毒症状,精神恢复正常,行动自如,体重不再减少。解毒后第3天体重增加,第4天增重明显,恢复正常,精神良好,行动迅速。表明DON 呕吐毒素单抗治疗效果明显,见效快。注射10μl单抗剂量也较合适。

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