青霉素抗原,青霉素抗体应用于胶体金的工艺如下:
标记: ① 青霉素抗体金垫标记条件:
a. 1 ml金液(20nm左右)+(30-35-40-45 ul ) 1%K2CO3+1.5mg/ml 抗体 2.0 ul,标记量为 4-6微克蛋白/ ml 金液。使用时先用保护剂将类抗体稀释10倍,然后再加到金液中。
b,室温振荡.30分
c. 加封闭液20 ul/ml,室温振荡. 30分
d. 离心12000转,8分钟
e. 100 ul复溶液复溶(PH8.2),铺金 ,作为金条1号。
① 青霉素加强抗体金垫标记条件:
a. 1 ml金液(20nm左右)+(30-35-40-45 ul ) 1%K2CO3+1.5mg/ml 类抗体 2.0 ul,标记量为 4-6微克蛋白/ ml 金液。
b,室温振荡.30分
c. 加封闭液20 ul/ml,室温振荡. 30分
d. 离心12000转,8分钟
e. 100 ul复溶液复溶(PH8.2),铺金 ,作为金条2号。
② C线划线: 羊抗鼠 1:10-1:200
③ T线划线: 青霉素抗原。1:10-1:200
注意事项:
1,组装胶体金试纸条时,需要将金条1号和2号 同时按顺序粘贴在大板上。
2,每种蛋白抗原的物理性质不同,所以不能用一贯的千篇一律的加氯化钠的方式看稳定性,要看最终T线颜色的深度。
3, 4个碳酸钾浓度标记出来的金条,哪个T线最深 就用那个最合适的PH条件,这是王道。
4,当标记时或者吹干后出现发紫,发灰,用保护剂便可解决 。