禽白血病病毒抗原ELISA批量净化检测试剂盒说明书
产品编号:DWLD001
一、原理
本试剂盒采用直接竞争ELISA方法批量检测禽白血病病毒抗原。
二、用途
批量检测蛋清、泄殖腔式子、肝脏、病毒培养液等一批中禽白血病病毒,检测结果可用于ALV感染的辅助诊断。
三、所需材料
仪器:微孔板酶标仪450 nm/630 nm、振荡器、离心机、、离心管(5 mL, 50 mL)
微量移液器:单道 1µL~10 µL、10 µL~100µL
多道 50µL~300µL
试剂:去离子水
五、 试剂盒组成
序号 |
组成部分 |
96T装量 |
1 |
阳性对照酶标板 |
96孔(1-5块) |
2 |
阳性对照 |
2mL |
3 |
酶标物 |
13 mL |
4 |
底物液A液 |
7 mL |
5 |
底物液B液 |
7 mL |
6 |
终 止 液 |
7 mL |
7 |
20×浓缩洗涤液 |
40 mL |
8 |
2×样品稀释液 |
40 mL |
六、溶液配制
配液1: 洗涤工作液
用去离子水将20×浓缩洗涤液按1 : 19体积比进行稀释,用于酶标板的洗涤,洗涤工作液在4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。
配液2: 1 ×样品稀释液
用去离子水将2 ×样品稀释液按1:1体积比进行稀释。配好的1 ×样品稀释液在4℃环境可保存一个月,用前一天取出回温。
七、样本前处理
样本处理前须知:
① 处理完的样品应及时进行下步检测,实验中必须使用一次性吸头,吸取不同试剂时要更换吸头。
② 样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。
样本处理:
①蛋清取全蛋,破碎后取蛋清,,置-20℃以下冻融1次,用微量移液器吸取蛋清直接进行检测。
②泄殖腔拭子用无菌棉签于待检鸡只泄殖腔取样后,放入0.5ml 1×样品稀释液中,置-20℃以下冻融1次,剧烈震荡1分钟,挤出棉签中的液体,弃棉签。以5000r/min离心5分钟,取上清直接进行检测。
③病毒培养液,取病毒培养液以8000r/min离心10分钟,取上清直接进行检测。
④肝脏等组织,取约2g加入0.5ml 1×样品稀释液,研磨破碎,置-20℃以下冻融1次,以5000r/min离心5分钟,取上清直接进行检测。
八、 酶标免疫测定程序
①将所有所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回升至室温(20~25℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。